Ulazno ispravljena anjonska struja u membrani citoplazmatskih kapi iz gljive Phycomyces blakesleeanus

Abstract

Jonski kanali filamentoznih gljiva su još uvek u velikoj meri neistraženi, uglavnom usled prisustva brzo regenerišućeg ćelijskog zida. Naš model sistem citoplazmatskih kapi dobijenih iz sporangiofora gljive Phycomyces blakesleeanus, odnosno ćelijske membrane koja još uvek nije pokrivena ćelijskim zidom, nam omogućava da registrujemo struje metodom nametnute voltaže na deliću membrane. U hipoosmotskim uslovima, pored izlazno ispravljene anjonske struje (ORIC), u familiji struja sa cele membrane su uočljive i ulazno ispravljene anjonske struje koje su propustljive za glukonat. Ovde će biti opisane po prvi put. U hipoosmotskoj sredini (kada je prisutan i ORIC), sa hlorom simetrično zamenjenim glukonatom, glukonat propustljiva struja se javlja u 50% eksperimenata (n=10). U izoosmotskim uslovima, kada ORIC nije aktivan, ulazna struja je 2.5 puta veća kada je simetrični glukonat provodni jon nego kada je prisutan hlor (n=11, prisutna u 72% zapisa). Fit voltažne zavisnosti struje Bolcmanovom funkcijom pokazuje jasno ulazno ispravljanje, sa vrednošću nalektrisanja vratnica -0.55±0.10 (p<0.001). Upadljiva osobina glukonat provodljive struje je spora deaktivacija i odložena aktivacija (na potencijalu -150 mV struja se aktivira posle 137±36 ms (n=8)). Snimanje aktivnosti pojedinačnih kanala u asimetričnim anjonskim uslovima (glukonat/hlor) pokazalo je da u membrani citoplazmatske kapi postoje najmanje tri različita jonska kanala (u 3 od 30 eksperimenata) koji su propustljiviji za glukonat nego za hlor sa sledećim karakteristikama: provodljivost (u pS) 83, 60 i 75; potencijal reverzije (mV) -13,13, 9,42, -5,28; propustljivost za glukonat/propustljivost za hlor 1.80, 1.53, 1.27.