Hipofizno-ovarijalni sistem pacova od fetalnog do peripubertalnog perioda života nakon intrauterinog izlaganja deksametazonu
Pituitary-ovarian axis of rats from fetal to peripubertal period of life after intrauterine exposure to dexamethasone
Апстракт:
Tokom fetalnog razvića organizam prolazi kroz “kritične periode”, tokom kojih se
dešavaju intenzivne ćelijske deobe, razvijanje i sazrevanje tkiva, organa i organskih sistema.
Sredina u kojoj fetus raste i razvija se u velikoj meri odreñuje kvalitet razvojnog procesa, a
svaka promena uslova dovodi do čitavog niza poremećaja, koji mogu biti praćeni
smanjenjem fetalnog rasta ili IUGR (eng. Intrauterine growth retardation). Posledice IUGR
su dugotrajne i ispoljavaju se u vidu različitih metaboličkih i kardiovaskularnih oboljenja u
kasnijem životu. Fetalno okruženje na taj način odreñuje adultni fenotip, a njihova
povezanost proučava se u okviru koncepta programiranja. Najčešće korišćeni
eksperimentalni pristupi u proučavanju programiranja i efekta IUGR su dijeta majke koja
vodi pothranjenosti, izazivanje stresne reakcije kod majke ili primena antenatalne terapije
glukokortikoidima. Svaki od ovih eksperimentalnih modela različitim mehanizmima dovodi
do izlaganja fetusa povećanoj koncentraciji glukokortikoida, koji u velikoj meri mogu da
poremete fiziološki tok razvojnog procesa.
Cilj ove studije je bio da se ustanovi da li je izlaganje fetusa pacova od 16. do 18.
dana gestacije sintetičkom glukokortikoidu deksametazonu programiralo razvoj i funkciju
hipofizno-ovarijalnog sistema od fetalnog do peripubertalnog perioda života.
Predmet istraživanja u ovoj doktorskoj disertaciji bili su fetusi i ženke pacova koje
su od 16. do 18. dana gestacije izloženi deksametazonu.
Gravidne ženke pacova su tri uzastopna dana (od 16. do 18. dana gestacije)
subkutano tretirane deksametazonom (Dexamethasonis phosphat - Dx, Krka, p.o., Novo
Mesto) rastvorenom u fiziološkom rastvoru (0.9% NaCl), u dozi od 1.0, 0.5 i 0.5 mg Dx/kg
t.m./dan. Kontrolna grupa gravidnih ženki primala je u istom periodu, adekvatnu
zapreminu fiziološkog rastvora.
Potomci gravidnih ženki koje su primale deksametazon (Dx), odnosno fiziološki
rastvor (K) žrtvovani su u fetalnom (19. i 21. fetalni dan), neonatalnom (5. dan),
infantilnom (16. dan) i peripubertalnom (38. dan) periodu života. Za obeležavanje
gonadotropnih (FSH i LH) ćelija hipofize korišćeno je imunocitohemijsko bojenje, dok su
preseci jajnika bojeni histološkim bojenjem hematoksilin & eozin. Obojeni preseci hipofiza
i jajnika stereološki i morfometrijski su analizirani, uz pomoć newCast stereološkog
softverskog paketa. Dobijene su vrednosti volumena hipofize i jajnika, kao i apsolutni broj
FSH i LH ćelija, njihov volumen, volumenska i numerička gustina. Koncentracija FSH i
LH u cirkulaciji odreñena je biohemijskom RIA metodom. Pored volumena, u fetalnom
jajniku odreñen je i apsolutni broj zdravih i degenerisanih germinativnih ćelija, a u jajniku
ženki u postnatalnom periodu broj zdravih i atretičnih primordijalnih, primarnih,
višeslojnih i antralnih folikula, kao i broj žutih tela. Dobijeni rezultati su statistički obrañeni.
Intrauterino izlaganje deksametazonu izazvalo je IUGR (eng. intrauterine growth
retardation) koje se manifestuje značajno smanjenom (p<0.05) telesnom masom kod fetusa
starih 21 dan, a značajno smanjenje (p<0.05) telesne mase zabeleženo je i u postnatalnim
periodima
Volumen hipofize i adenohipoze značajno su smanjeni (p<0.05) u fetalnom,
neonatalnom, infantilnom i peripubertalnom periodu života.
Analizirani stereološki parametri su se po istom obrascu menjali i kod FSH i kod
LH ćelija, kod ženki pacova intrauterino izloženih deksametazonu u odnosu na kontrolu.
Tako je broj gonadotropnih ćelija značajno smanjen (p<0.05) od fetalnog, preko
neonatalnog, infantilnog do peripubertalnog perioda života, a volumen je značajno smanjen
(p<0.05) samo 19. fetalnog dana. Volumenska i numerička gustina gonadotropnih ćelija
značajno su smanjene (p<0.05) u neonatalnom i infantilnom periodu života.
Koncentracije FSH i LH su značajno smanjene (p<0.05) u neonatalnom,
infantilnom i peripubertalnom periodu života kod ženki intrauterino izloženih
deksametazonu u odnosu na kontrolu..
Nakon intrauterinog izlaganja deksametazonu volumen jajnika se značajno smanjio
(p<0.05) u svim ispitivanim periodima života u odnosu na kontrolne vrednosti.
Jajnik ženki pacova u fetalnom periodu nema definitivnu histološku organizaciju,
tako da se u njima uočava prisustvo zdravih i degenerisanih germinativnih ćelija, i
somatskih ćelija. Kvantifikacijom germinativnih ćelija, ustanovljeno je da je deksametazon u
jajniku 19 dana starih fetusa uticao na značajno povećanje (p<0.05) broja degenerisanih na
račun zdravih germinativnih ćelija, dok ukupan broj germinativnih ćelija nije promenjen u
odnosu na kontrolu. U jajniku 21 dan starih fetusa, deksametazon je uticao na značajno
smanjenje (p<0.05) ukupnog broja germinativnih ćelija, kao i na značajno smanjenje broja
zdravih, a povećanje broja degenerisanih germinativnih ćelija (p<0.05).
U jajniku 5 i 16 dana starih ženki pacova intrauterino izloženih deksametazonu
prisutne su iste klase zdravih i atretičnih folikula kao i kod kontrolnih životinja, odnosno
primordijalni, primarni i višeslojni folikuli, ali u značajno smanjenom broju (p<0.05).
Za razliku od jajnika kontrolnih peripubertalnih ženki, u kojima su prisutna žuta
tela, u jajnicima peripubertalnih ženki intrauterino izloženih deksametazonu još uvek ih
nema. Broj zdravih primordijalnih i primarnih folikula je značajno smanjen (p<0.05), dok je
broj analiziranih klasa zdravih i atretičnih višeslojnih i antralnih folikula značajno povećan
(p<0.05) u odnosu na kontrolne vrednosti.
Rezultati ove studije nedvosmisleno pokazuju da je reproduktivni potencijal ženki
koje su tokom fetalnog razvoja bile izložene deksametazonu smanjen, a polno sazrevanje
odloženo. S obzirom da je deksametazon uticao u ključnom momentu razvoja hipofize i
jajnika u fetalnom periodu, promene koje je izazvao su trajne, i bitno odreñuju kvalitet
reproduktivnog života ženki. Ovakav rezultat ima veliki značaj i primenu u humanoj
medicini, s obzirom da su uslovi koji do njega mogu dovesti deo svakodnevnog života
savremene žene i buduće majke.
Кључне речи:
Deksametazon; Fetusi; Potomci; Gonadotropne ćelije; Jajnik; Germinativne ćelije; FolikuliИзвор:
University of Belgrade, Faculty of Biology, 2012, 1-185Финансирање / пројекти:
- Одговор неуроендокриног система пацова на одабране биљне екстракте, фитоестрогене, стероидне и пептидне хормоне (RS-MESTD-Basic Research (BR or ON)-173009)
URI
http://eteze.bg.ac.rs/application/showtheses?thesesId=76https://fedorabg.bg.ac.rs/fedora/get/o:3475/bdef:Content/download
http://vbs.rs/scripts/cobiss?command=DISPLAY&base=70036&RID=1024526770
http://nardus.mpn.gov.rs/123456789/2064
https://radar.ibiss.bg.ac.rs/handle/123456789/2413