Genetička transformacija lista i korena kičice (Centaurium erythraea) GV3101 sojem A. tumefaciens
Генетичка трансформација листа и корена кичице (Centaurium erythraea) помоћу GV3101 соја A. tumefaciens
2022
Tip dokumenta:
Konferencijski prilog (Objavljena verzija)
,
© 2022 Institute for Biological Research "Siniša Stanković" – National Institute of Republic of Serbia, University of Belgrade
Metapodaci
Prikaz svih podataka o dokumentuApstrakt:
Описана је метода за транформацију C. erythraea сојем GV3101 А. tumefaciens, тестирана на одсечцима листова и врховима коренова биљака гајених in vitro. Сој GV3101 носи бинарни плазмид pXK7S2D који обезбеђује резистенцију на канамицин. Након кокултивације експлантати су преношени на серију подлога за регенерацију са додатком различитих регулатора растења: 1 mg·l-1 бензиламинопурина, 0.1 или 0.4 mg·l-1 индол-3-сирћетне киселине и 1 mg·l-1 кинетина. Као селекциони антибиотик коришћен је канамицин у концентрацији од 50 mg·l-1 за листове или 25 mg·l-1 за коренове, док су цефотаксим и ванкомицин концентрација 250 mg·l-1, односно 50 mg·l-1 додавани у подлогу ради превенције раста бактерија. Контролни експлантати су преношени на подлоге истог састава и на подлогу без канамицина. Након 6 недеља на листовима су уочени спонтано формирани изданци, док на кореновима није запажена регенерација, чак ни на контролним експлантатима. Изданци формирани на листовима одсецани су, пребацивани на MS подлогу са 0.2 mg·l-1 индол-3-бутерне киселине и 150 mg·l-1 цефотаксима и гајени до потпуног формирања биљке. Регенерисане биљке су тестиране на присуство трансгена методом Phire PCR-a. Успешност трансформације износила је 17.64%. Имајући у виду да је до сада помоћу A. tumefaciens трансформисано само неколико биљних врста из фамилије Gentianaceae, описана техника за трансформацију листа нуди перспективу за даљу примену, нарочито на врстама рода Centaurium.
Finansiranje / projekti:
- Ministarstvo nauke, tehnološkog razvoja i inovacija Republike Srbije, institucionalno finansiranje - 200007 (Univerzitet u Beogradu, Institut za biološka istraživanja 'Siniša Stanković') (RS-MESTD-inst-2020-200007)
U:
- (poster) Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Serbia.
Povezane informacije:
- Povezani sadržaj
https://radar.ibiss.bg.ac.rs/handle/123456789/5894