TY  - CONF
AU  - Tovilović-Kovačević, Gordana
AU  - Krstić-Milošević, Dijana
AU  - Vinterhalter, Branka
AU  - Toljić, Mina
AU  - Perović, Vladimir
AU  - Trajković, Vladimir
AU  - Harhaji-Trajković, Ljubica
AU  - Zogović, Nevena
PY  - 2022
UR  - http://radar.ibiss.bg.ac.rs/handle/123456789/5317
AB  - Глиобластом je најчешћи и најагресивнији тип тумора централног нервног система код одраслих. Циљ ове студије је био да се процени антиглиомски потенцијал екстраката коренова Gentiana dinarica у култури U251 ћелија хуманог глиобластома. Метанолни екстракти су добијени из нетрансформисаних коренова G. dinarica (екстракт 1, Е1) и трансгених коренова добијених коришћењем два соја Agrobacterium rhizogenes: A4M70GUS (екстракт 2, Е2) и 15834/PI (екстракт 3, Е3). Трансформацијом коренова са A. rhizogenes стимулисана је продукција ксантона, секундарних метаболита са доказаним антиканцерским ефектом. За разлику од Е1 и Е2, Е3 је снажно инхибирао раст U251 ћелија, изазвао застој ћелијског циклуса у G2/M фази и повећао експресију маркера диференцијације – астроцитног глијалног фибриларног киселог протеина (GFAP) и неуронског β-тубулина. Е3 је стимулисао Akt/mTOR-зависну аутофагију, на шта је указивало повећање нивоа аутофагног маркера LC3-II протеина и појачана деградација селективне аутофагне мете протеина p62. Инхибиција аутофагије је спречила експресију маркера диференцијације, без утицаја на застој у ћелијском циклусу. Е3 је повећао и нивое оксидативног стреса у ћелији, а антиоксиданси N-ацетил цистеин (NAC) и витамин Е су инхибирали и аутофагију и диференцијацију U251 ћелија изазвану Е3. Активна компонента Е3 је највероватније ксантонски агликон норсверцијанин, најзаступљеније једињење у Е3. Норсверцијанин је, као и Е3, зауставио пролиферацију U251 ћелија у G2/M фази ћелијског циклуса и изазвао диференцијацију, аутофагију и оксидативни стрес. Резултати ове студије указују да би Е3 и норсверцијанин могли бити кандидати за диференцијациону терапију глиобластома.
AB  - Glioblastom je najčešći i najagresivniji tip tumora centralnog nervnog sistema kod odraslih. Cilj ove studije je bio da se proceni antigliomski potencijal ekstrakata korenova Gentiana dinarica u kulturi U251 ćelija humanog glioblastoma. Metanolni ekstrakti su dobijeni iz netransformisanih korenova G. dinarica (ekstrakt 1, E1) i transgenih korenova dobijenih korišćenjem dva soja Agrobacterium rhizogenes: A4M70GUS (ekstrakt 2, E2) i 15834/PI (ekstrakt 3, E3). Transformacijom korenova sa A. rhizogenes stimulisana je produkcija ksantona, sekundarnih metabolita sa dokazanim antikancerskim efektom. Za razliku od E1 i E2, E3 je snažno inhibirao rast U251 ćelija, izazvao zastoj ćelijskog ciklusa u G2/M fazi i povećao ekspresiju markera diferencijacije – astrocitnog glijalnog fibrilarnog kiselog proteina (GFAP) i neuronskog β-tubulina. E3 je stimulisao Akt/mTOR-zavisnu autofagiju, na šta je ukazivalo povećanje nivoa autofagnog markera LC3-II proteina i pojačana degradacija selektivne autofagne mete proteina p62. Inhibicija autofagije je sprečila ekspresiju markera diferencijacije, bez uticaja na zastoj u ćelijskom ciklusu. E3 je povećao i nivoe oksidativnog stresa u ćeliji, a antioksidansi N-acetil cistein (NAC) i vitamin E su inhibirali i autofagiju i diferencijaciju U251 ćelija izazvanu E3. Aktivna komponenta E3 je najverovatnije ksantonski aglikon norsvercijanin, najzastupljenije jedinjenje u E3. Norsvercijanin je, kao i E3, zaustavio proliferaciju U251 ćelija u G2/M fazi ćelijskog ciklusa i izazvao diferencijaciju, autofagiju i oksidativni stres. Rezultati ove studije ukazuju da bi E3 i norsvercijanin mogli biti kandidati za diferencijacionu terapiju glioblastoma.
PB  - Belgrade: Serbian Biological Society
C3  - Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Serbia
T1  - Antigliomski efekat ekstrakta korena Gentiana dinarica Beck. obogaćenog ksantonima
T1  - Антиглиомски ефекат екстракта корена Gentiana dinarica Beck. обогаћеног ксантонима
SP  - 280
UR  - https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_ibiss_5317
ER  - 

@conference{
author = "Tovilović-Kovačević, Gordana and Krstić-Milošević, Dijana and Vinterhalter, Branka and Toljić, Mina and Perović, Vladimir and Trajković, Vladimir and Harhaji-Trajković, Ljubica and Zogović, Nevena",
year = "2022",
abstract = "Глиобластом je најчешћи и најагресивнији тип тумора централног нервног система код одраслих. Циљ ове студије је био да се процени антиглиомски потенцијал екстраката коренова Gentiana dinarica у култури U251 ћелија хуманог глиобластома. Метанолни екстракти су добијени из нетрансформисаних коренова G. dinarica (екстракт 1, Е1) и трансгених коренова добијених коришћењем два соја Agrobacterium rhizogenes: A4M70GUS (екстракт 2, Е2) и 15834/PI (екстракт 3, Е3). Трансформацијом коренова са A. rhizogenes стимулисана је продукција ксантона, секундарних метаболита са доказаним антиканцерским ефектом. За разлику од Е1 и Е2, Е3 је снажно инхибирао раст U251 ћелија, изазвао застој ћелијског циклуса у G2/M фази и повећао експресију маркера диференцијације – астроцитног глијалног фибриларног киселог протеина (GFAP) и неуронског β-тубулина. Е3 је стимулисао Akt/mTOR-зависну аутофагију, на шта је указивало повећање нивоа аутофагног маркера LC3-II протеина и појачана деградација селективне аутофагне мете протеина p62. Инхибиција аутофагије је спречила експресију маркера диференцијације, без утицаја на застој у ћелијском циклусу. Е3 је повећао и нивое оксидативног стреса у ћелији, а антиоксиданси N-ацетил цистеин (NAC) и витамин Е су инхибирали и аутофагију и диференцијацију U251 ћелија изазвану Е3. Активна компонента Е3 је највероватније ксантонски агликон норсверцијанин, најзаступљеније једињење у Е3. Норсверцијанин је, као и Е3, зауставио пролиферацију U251 ћелија у G2/M фази ћелијског циклуса и изазвао диференцијацију, аутофагију и оксидативни стрес. Резултати ове студије указују да би Е3 и норсверцијанин могли бити кандидати за диференцијациону терапију глиобластома., Glioblastom je najčešći i najagresivniji tip tumora centralnog nervnog sistema kod odraslih. Cilj ove studije je bio da se proceni antigliomski potencijal ekstrakata korenova Gentiana dinarica u kulturi U251 ćelija humanog glioblastoma. Metanolni ekstrakti su dobijeni iz netransformisanih korenova G. dinarica (ekstrakt 1, E1) i transgenih korenova dobijenih korišćenjem dva soja Agrobacterium rhizogenes: A4M70GUS (ekstrakt 2, E2) i 15834/PI (ekstrakt 3, E3). Transformacijom korenova sa A. rhizogenes stimulisana je produkcija ksantona, sekundarnih metabolita sa dokazanim antikancerskim efektom. Za razliku od E1 i E2, E3 je snažno inhibirao rast U251 ćelija, izazvao zastoj ćelijskog ciklusa u G2/M fazi i povećao ekspresiju markera diferencijacije – astrocitnog glijalnog fibrilarnog kiselog proteina (GFAP) i neuronskog β-tubulina. E3 je stimulisao Akt/mTOR-zavisnu autofagiju, na šta je ukazivalo povećanje nivoa autofagnog markera LC3-II proteina i pojačana degradacija selektivne autofagne mete proteina p62. Inhibicija autofagije je sprečila ekspresiju markera diferencijacije, bez uticaja na zastoj u ćelijskom ciklusu. E3 je povećao i nivoe oksidativnog stresa u ćeliji, a antioksidansi N-acetil cistein (NAC) i vitamin E su inhibirali i autofagiju i diferencijaciju U251 ćelija izazvanu E3. Aktivna komponenta E3 je najverovatnije ksantonski aglikon norsvercijanin, najzastupljenije jedinjenje u E3. Norsvercijanin je, kao i E3, zaustavio proliferaciju U251 ćelija u G2/M fazi ćelijskog ciklusa i izazvao diferencijaciju, autofagiju i oksidativni stres. Rezultati ove studije ukazuju da bi E3 i norsvercijanin mogli biti kandidati za diferencijacionu terapiju glioblastoma.",
publisher = "Belgrade: Serbian Biological Society",
journal = "Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Serbia",
title = "Antigliomski efekat ekstrakta korena Gentiana dinarica Beck. obogaćenog ksantonima, Антиглиомски ефекат екстракта корена Gentiana dinarica Beck. обогаћеног ксантонима",
pages = "280",
url = "https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_ibiss_5317"
}

Tovilović-Kovačević, G., Krstić-Milošević, D., Vinterhalter, B., Toljić, M., Perović, V., Trajković, V., Harhaji-Trajković, L.,& Zogović, N.. (2022). Antigliomski efekat ekstrakta korena Gentiana dinarica Beck. obogaćenog ksantonima. in Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Serbia
Belgrade: Serbian Biological Society., 280.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_ibiss_5317

Tovilović-Kovačević G, Krstić-Milošević D, Vinterhalter B, Toljić M, Perović V, Trajković V, Harhaji-Trajković L, Zogović N. Antigliomski efekat ekstrakta korena Gentiana dinarica Beck. obogaćenog ksantonima. in Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Serbia. 2022;:280.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_ibiss_5317 .

Tovilović-Kovačević, Gordana, Krstić-Milošević, Dijana, Vinterhalter, Branka, Toljić, Mina, Perović, Vladimir, Trajković, Vladimir, Harhaji-Trajković, Ljubica, Zogović, Nevena, "Antigliomski efekat ekstrakta korena Gentiana dinarica Beck. obogaćenog ksantonima" in Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Serbia (2022):280,
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_ibiss_5317 .

TY  - JOUR
AU  - Tovilović-Kovačević, Gordana
AU  - Krstić Milošević, Dijana
AU  - Vinterhalter, Branka
AU  - Toljić, Mina
AU  - Perović, Vladimir
AU  - Trajković, Vladimir
AU  - Harhaji-Trajković, Ljubica
AU  - Zogović, Nevena
PY  - 2018
UR  - https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0944711318300874?via%3Dihub
UR  - https://radar.ibiss.bg.ac.rs/handle/123456789/3125
AB  - BACKGROUND Glioblastoma multiforme (GMB) is the most malignant of all brain tumors with poor prognosis. Anticancer potential of xanthones, bioactive compounds found in Gentiana dinarica, is well-documented. Transformation of G. dinarica roots with Agrobacterium rhizogenes provides higher xanthones accumulation, which enables better exploitation of these anticancer compounds. HYPOTHESIS/PURPOSE The aim of this study was to investigate antiglioma effect of three different G. dinarica extracts: E1—derived from untransformed roots, E2—derived from roots transformed using A. rhizogenes strain A4M70GUS, and E3—derived from roots transformed using A. rhizogenes strain 15834/PI. Further, mechanisms involved in anticancer potential of the most potent extract were examined in detail, and its active component was determined. METHODS The cell viability was assessed using MTT and crystal violet test. Cell cycle analysis, the expression of differentiation markers, the levels of autophagy, and oxidative stress were analyzed by flow cytometry. Autophagy and related signaling pathways were assessed by immunoblotting. RESULTS E3, in contrast to E1 and E2, strongly reduced growth of U251 human glioblastoma cells, triggered cell cycle arrest in G2/M phase, changed cellular morphology, and increased expression of markers of differentiated astrocytes (glial fibrillary acidic protein) and neurons (β-tubulin). E3 stimulated autophagy, as demonstrated by enhanced intracellular acidification, increased microtubule-associated light chain 3B (LC3-I) conversion to autophagosome associated LC3-II, and decreased level of selective autophagy target p62. Induction of autophagy was associated with Akt-dependent inhibition of main autophagy suppressor mammalian target of rapamycin (mTOR). Both genetic and pharmacological inhibition of autophagy suppressed the expression of differentiation markers, but had no effect on cell cycle arrest in E3-treated cells. E3 stimulated oxidative stress, and antioxidants vitamin E and N-acetyl cysteine inhibited autophagy and differentiation of E3-treated U251 cells. The most prevalent compound of E3, xanthone aglycone norswertianin, also arrested glioblastoma cell proliferation in G2/M phase and induced glioblastoma cell differentiation through induction of autophagy and oxidative stress. CONCLUSION These results indicate that E3 and its main active component norswertianin may serve as a potential candidate for differentiation therapy of glioblastoma.
T2  - Phytomedicine
T1  - Xanthone-rich extract from Gentiana dinarica transformed roots and its active component norswertianin induce autophagy and ROS-dependent differentiation of human glioblastoma cell line
VL  - 47
DO  - 10.1016/J.PHYMED.2018.03.052
SP  - 151
EP  - 160
ER  - 

@article{
author = "Tovilović-Kovačević, Gordana and Krstić Milošević, Dijana and Vinterhalter, Branka and Toljić, Mina and Perović, Vladimir and Trajković, Vladimir and Harhaji-Trajković, Ljubica and Zogović, Nevena",
year = "2018",
abstract = "BACKGROUND Glioblastoma multiforme (GMB) is the most malignant of all brain tumors with poor prognosis. Anticancer potential of xanthones, bioactive compounds found in Gentiana dinarica, is well-documented. Transformation of G. dinarica roots with Agrobacterium rhizogenes provides higher xanthones accumulation, which enables better exploitation of these anticancer compounds. HYPOTHESIS/PURPOSE The aim of this study was to investigate antiglioma effect of three different G. dinarica extracts: E1—derived from untransformed roots, E2—derived from roots transformed using A. rhizogenes strain A4M70GUS, and E3—derived from roots transformed using A. rhizogenes strain 15834/PI. Further, mechanisms involved in anticancer potential of the most potent extract were examined in detail, and its active component was determined. METHODS The cell viability was assessed using MTT and crystal violet test. Cell cycle analysis, the expression of differentiation markers, the levels of autophagy, and oxidative stress were analyzed by flow cytometry. Autophagy and related signaling pathways were assessed by immunoblotting. RESULTS E3, in contrast to E1 and E2, strongly reduced growth of U251 human glioblastoma cells, triggered cell cycle arrest in G2/M phase, changed cellular morphology, and increased expression of markers of differentiated astrocytes (glial fibrillary acidic protein) and neurons (β-tubulin). E3 stimulated autophagy, as demonstrated by enhanced intracellular acidification, increased microtubule-associated light chain 3B (LC3-I) conversion to autophagosome associated LC3-II, and decreased level of selective autophagy target p62. Induction of autophagy was associated with Akt-dependent inhibition of main autophagy suppressor mammalian target of rapamycin (mTOR). Both genetic and pharmacological inhibition of autophagy suppressed the expression of differentiation markers, but had no effect on cell cycle arrest in E3-treated cells. E3 stimulated oxidative stress, and antioxidants vitamin E and N-acetyl cysteine inhibited autophagy and differentiation of E3-treated U251 cells. The most prevalent compound of E3, xanthone aglycone norswertianin, also arrested glioblastoma cell proliferation in G2/M phase and induced glioblastoma cell differentiation through induction of autophagy and oxidative stress. CONCLUSION These results indicate that E3 and its main active component norswertianin may serve as a potential candidate for differentiation therapy of glioblastoma.",
journal = "Phytomedicine",
title = "Xanthone-rich extract from Gentiana dinarica transformed roots and its active component norswertianin induce autophagy and ROS-dependent differentiation of human glioblastoma cell line",
volume = "47",
doi = "10.1016/J.PHYMED.2018.03.052",
pages = "151-160"
}

Tovilović-Kovačević, G., Krstić Milošević, D., Vinterhalter, B., Toljić, M., Perović, V., Trajković, V., Harhaji-Trajković, L.,& Zogović, N.. (2018). Xanthone-rich extract from Gentiana dinarica transformed roots and its active component norswertianin induce autophagy and ROS-dependent differentiation of human glioblastoma cell line. in Phytomedicine, 47, 151-160.
https://doi.org/10.1016/J.PHYMED.2018.03.052

Tovilović-Kovačević G, Krstić Milošević D, Vinterhalter B, Toljić M, Perović V, Trajković V, Harhaji-Trajković L, Zogović N. Xanthone-rich extract from Gentiana dinarica transformed roots and its active component norswertianin induce autophagy and ROS-dependent differentiation of human glioblastoma cell line. in Phytomedicine. 2018;47:151-160.
doi:10.1016/J.PHYMED.2018.03.052 .

Tovilović-Kovačević, Gordana, Krstić Milošević, Dijana, Vinterhalter, Branka, Toljić, Mina, Perović, Vladimir, Trajković, Vladimir, Harhaji-Trajković, Ljubica, Zogović, Nevena, "Xanthone-rich extract from Gentiana dinarica transformed roots and its active component norswertianin induce autophagy and ROS-dependent differentiation of human glioblastoma cell line" in Phytomedicine, 47 (2018):151-160,
https://doi.org/10.1016/J.PHYMED.2018.03.052 . .