Aktivnost komponenti adenozinskog signalnog sistema astrocita u modelu moždane povrede in vivo i in vitro
Activity of the astrocytes' adenosine signaling system components in model of traumatic brain injury in vivo and in vitro
2013
Аутори:
Parabucki, AnaОстала ауторства
Bjelobaba, IvanaNedeljković, Nadežda
Stojiljković, Mirjana
Isaković, Aleksandra
Laketa, Danijela
Тип документа:
Докторска теза (Објављена верзија)
Метаподаци
Приказ свих података о документуАпстракт:
Glavno obeležje traumatske povrede mozga (TPM) je reaktivna astroglioza koja, između ostalog, uzrokuje i promene u signalizaciji purinima. Posebno važan aspekt purinske signalizacije u patološkim procesima centralnog nervnog sistema predstavlja dinamika promena vanćelijskih koncentracija neuroprotektora adenozina. Stoga je cilj ove doktorske teze bio ispitivanje ekspresije i funkcije komponenti adenozinskog signalnog sistema astrocita u in vivo i in vitro modelu moždane povrede, sa posebnim osvrtom na ulogu ekvilibrišućih nukleozidnih transportera (ENT).
U in vivo studiji, izvedenoj na modelu ubodne lezije kore prednjeg mozga pacova, je pokazano da povreda dovodi do dinamičnih promena u ekspresiji ENT, ektonukleotidaza i adenozinskog A1 receptora. Sem toga, povreda uzrokuje i ćelijsku re-distribuciju ENT1/2 i ushodnu regulaciju transportera na reaktivnim astrocitima, što je posebno izraženo sedmog dana nakon ozlede.
Uloga astrocita u orkestraciji adenozinskog signalnog sistema nakon povrede je detaljnije ispitana in vitro, nakon skarifikacije astrocitnog jednosloja. Rezultati su pokazali da skarifikacija povećava ekspresiju ENT1 i ENT2 tek u kasnijim vremenima. Bifazna promena u ekspresiji ekto-5`-nukleotidaze (e-5NT) je iskazana prvobitnim smanjenjem i potom povećanjem ekspresije u kasnijim vremenima nakon skarifikacije. Pored toga, skarifikacija astrocitnog jednosloja vodi promenama u koncentracijama adenozina i njegovih metabolita u ćelijskom medijumu. Naime, porast koncentracija adenozina u ranim vremenima nakon povrede, bio je praćen padom u kasnijim vremenima. Blokiranje ENT dipiridamolom (DPM) je dovelo do promena u koncentracijama adenozina nakon
skarifikacije, ukazavši na ulogu ENT1/2 u kontroli vanćelijskih koncentracija ovog nukleozida.
Kako bi se nagovestili mogući putevi regulacije ENT, kultura astrocita je podvrgnuta tretmanima adenozinom, ATP, DPM i blokatorom A1 receptora DPCPX. Rezultati su pokazali da ATP ushodno reguliše oba transportera i e-5NT, dok adenozin povećava ekspresiju ENT2 a smanjuje ekspresiju ENT1. Takođe, drugačiji efekat na ekspresiju ENT1/2 su imali i DPM i DPCPX, potvrdivši da su ova dva transportera regulisana drugačijim putevima.
Na kraju smo želeli da uporedimo efekte mehaničke povrede i CoCl2 izazvane hipoksije nakon četvoročasovnog na aktivnost komponenti adenozinskog sistema. Za razliku od skarifikacije, CoCl2 vodi ranom povećanju ekspresije ENT2, e-5NT i HIF-1α, kao i daleko većem povećanju vanćelijskih koncentracija adenozina.
Dobijeni rezultati predstavljaju pregled eskpresije i aktivnosti najvažnijih komponenti adenozinskog sistema astrocita nakon povrede, dajući dobru osnovu za dalja ispitivanja uloge astrocita u kontroli kruženja adenozina u fiziološkim i patološkim stanjima, kao i potencijalne kandidate za buduće terapije TPM.
Кључне речи:
Astrociti; Adenozin; Ekvilibrišući nukleotidni transporteri; Traumatska povreda mozga; Ektonukleotidaze; Ćelijska kultura; Purinska signalizacijaИзвор:
University of Belgrade, Faculty of Biology, 2013, 1-182Финансирање / пројекти:
URI
http://eteze.bg.ac.rs/application/showtheses?thesesId=763https://fedorabg.bg.ac.rs/fedora/get/o:7070/bdef:Content/download
http://vbs.rs/scripts/cobiss?command=DISPLAY&base=70036&RID=1024629426
http://nardus.mpn.gov.rs/123456789/2104
https://radar.ibiss.bg.ac.rs/handle/123456789/2403