Model ćelija C6 glioma pacova kao oruđe za pronalaženje novih terapeutskih strategija: karakterizacija rezistentnog fenotipa in vitro i in vivo
Rat C6 glioma model as a tool for discovering new therapeutic strategies: characterization of the resistant phenotype in vitro and in vivo
Апстракт:
Uspešnost terapije glioblastoma, najĉešćeg i najagresivnijeg malignog tumora centralnog nervnog sistema, je osujećena usled visokog stepena invazivnosti, kao i pojave rezistencije na hemioterapiju. Cilj ove doktorske disertacije je bio da se uspostavi i okarakteriše rezistentni gliomski model koji bi imao primenu u ispitivanju novih terapeutskih strategija u leĉenju ove teške bolesti. Kao poĉetni materijal korišćena je pacovska C6 ćelijska linija glioma, fenotipski sliĉna humanim glioblastomima. Za uspostavljanje rezistencije korišćen je prvi odobreni antigliomski lek 1,3-bis(2-hloroetil)-1-nitrozoureom (BCNU, karmustin), alkilirajući agens koji se koristi u terapiji primarnih i rekurentnih glioblastoma. Kontinuirana primena BCNU je dovela do razvoja rezistencije C6 ćelija ne samo na ovaj hemioterapeutik, već i na druge DNK oštećujuće agense, cisplatin (CPt) i temozolomid (TMZ). Novouspostavljena rezistentna ćelijska linija je oznaĉena kao RC6. Ispitivanje mehanizama rezistencije je obuhvatilo analizu promena na nivou apoptotske mašinerije i oštećenja DNK lanaca, kao i analizu promena u antioksidativnom kapacitetu izmeĊu C6 i RC6 ćelija. Rezistentna RC6 linija pokazuje smanjenu osetljivost na indukciju ćelijske smrti koja je praćena smanjenjem ekspresije antiapoptotskog faktora Bcl-2, proapoptotskog faktora Bad i efektorske kaspaze 3 na nivou iRNK i proteina. TakoĊe je pokazano smanjenje ekspresije iRNK antiapoptoskog Bcl-Xl i proapoptotskog Bax-a. Razvoj rezistencije je doveo i do znaĉajnog povećanja produkcije reaktivnih kiseoniĉnih vrsta (ROS) i smanjenja odnosa koncentracije oksidovanog i redukovanog glutationa. Zapaţeno je povećanje ekspresije iRNK komponenti antioksidativnog sistema (MnSOD, iNOS, GPx i MRP1) i smanjenje ekspresije iRNK za HIF-1α kod RC6 ćelija u odnosu na C6 ćelije.RC6 ćelije pokazuju povećanu osetljivost na delovanje doksorubicina (DOX). UtvrĊeno je da RC6 ćelije akumuliraju više DOX-a od C6 ćelija ĉemu doprinosi znaĉajno smanjenje ekspresije iRNK za ABCB1 membranski transporter, kao i smanjenje unutarćelijskog pH.Pored toga, RC6 ćelije proliferišu znatno sporije u odnosu na C6 ćelije što je karakteristiĉno za rezistentne ćelije, ali i za ćelije sa većim invazivnim sposobnostima. Rezultati potvrĊuju da invazivnosti RC6 ćelija doprinosi povišena ekspresija iRNK za metaloproteinazu MMP9...
Кључне речи:
Glioblastom; Hemiorezistencija; Karmustin (BCNU); Temozolomid (TMZ); Kolateralna senzitivnost; Invazivnost; Antigliomska terapija; CoQ10Извор:
University of Belgrade, Faculty of Biology, 2017Финансирање / пројекти:
URI
http://eteze.bg.ac.rs/application/showtheses?thesesId=4997https://fedorabg.bg.ac.rs/fedora/get/o:15650/bdef:Content/download
http://vbs.rs/scripts/cobiss?command=DISPLAY&base=70036&RID=1025151666
http://nardus.mpn.gov.rs/123456789/8252
https://radar.ibiss.bg.ac.rs/handle/123456789/2798