Uloga metilacije DNK u procesu epitelno-mezenhimske tranzicije humanih epitelnih ćelija konjuktive
The role of DNA methylation in the process of epithelial-mesenchymal transition of human conjunctival epithelial cells
2020
Преузимање 🢃
Тип документа:
Докторска теза (Објављена верзија)
Метаподаци
Приказ свих података о документуАпстракт:
Proces epitelno-mezenhimske tranzicije (EMT) može predstavljati značajan faktor koji doprinosi nastanku fibroznih promena konjuktive u različitim bolestima oka, ali je njegova uloga nedovoljno ispitana. Cilj ove doktorske disertacije podrazumevao je ispitivanje sposobnosti ćelijske linije humanih epitelnih ćelija konjuktive (HCjE) da uđu u proces EMT nakon infekcije uzročnikom trahoma, bakterijom Chlamydia trachomatis, i identifikaciju ključnih faktora povezanih sa pokretanjem i progresijom tranzicije na modelu procesa EMT indukovanog TGF-β proteinima. Posebna pažnja bila je usmerena na rasvetljavanje uloge metilacije DNK u regulaciji ekspresije gena uključenih u tranziciju HCjE ćelija. Praćenjem aktivacije signalnih puteva povezanih sa pokretanjem procesa EMT i ekspresije markera epitelnih/mezenhimskih ćelija pokazano je da HCjE ćelije poseduju sposobnost tranzicije nakon infekcije bakterijom C. trachomatis, praćene promenama u metilacionim profilima gena markera epitelnog/mezenhimskog fenotipa. Praćenjem morfologije, sposobnosti migracije i nivoa ekspresije gena markera uočeno je da dugotrajan tretman TGF-β1 izoformom ima najveći potencijal za pokretanje procesa EMT u HCjE ćelijama, dok su tretmani DNK demetilujućim agensom pokazali da metilacija DNK predstavlja važan mehanizam koji leži u osnovi ovog procesa. Promene profila metilacije DNK, detektovane analizom kriva topljenja i bisulfitnim sekvenciranjem, istakle su ključnu ulogu članova familije miR-200 u pokretanju i reverziji procesa EMT u HCjE ćelijama tretiranim TGF-β1 proteinima. Rezultati dobijeni u ovoj doktorskoj disertaciji ukazuju na mogućnost razvijanja novih selektivnih terapeutskih strategija u lečenju fibroznih promena konjuktive, zasnovanim na reverzibilnosti procesa EMT i epigenetičkih mehanizama.
Кључне речи:
Epitelno-mezenhimska tranzicija (EMT); Fibroza konjuktive; Humane epitelne ćelije konjuktive (HCjE); Chlamydia trachomatis; TGF-β; Metilacija DNK; 5-Azacitidin (5-AzaC); E-kadherin (CDH1); miRNK; familija miR-200Извор:
Faculty of Biology, University of Belgrade, 2020, 1-133Финансирање / пројекти:
- Сигнални молекули у дијабетесу: идентификација потенцијалних биолошких маркера укључених у модификацију и интеграцију сигналних путева у циљу предикције и интервенције у дијабетесу (RS-MESTD-Basic Research (BR or ON)-173020)
- Министарство науке, технолошког развоја и иновација Републике Србије, институционално финансирање - 200007 (Универзитет у Београду, Институт за биолошка истраживања 'Синиша Станковић') (RS-MESTD-inst-2020-200007)