Procena osetljivosti in vitro i in vivo testova u ekogenotokiskologiji i formulisanje smernica za njihovu primenu u istraživanjima na velikim ravničarskim rekama
Sensitivity assessment of in vitro and in vivo tests in ecogenotoxicology and guidelines formulation for their application in studies of large lowland rivers
Апстракт:
Uvođenje metoda uslovljenim efektima (eng. effect based methods), uključujući i genotoksikološke metode, u programe monitoringa i naučna istraživanja na velikim ravničarskim rekama, omogućilo bi sveobuhvatniju procenu stanja ekosistema i odnosa između samog hemijskog i ekološkog statusa. Osnovni ciljevi disertacije su ispitivanje osetljivosti in vitro i in vivo testova u ekogenotoksikologiji i formulisanje smernica za njihovu primenu u istraživanjima velikih ravničarskih reka. Studija je obuhvatila ukupno 17 lokaliteta u slivovima Velike Morave, Save i Dunava. Za procenu genotoksičnog efekta nativnih i koncentrisanih uzoraka rečne vode, in vitro pristup obuhvatio je SOS/umuC test, alkalni komet test na HepG2 i ZFL ćelijama, kao i analizu ćelijskog ciklusa na ZFL ćelijama. In vivo pristup je za procenu genotoksičnosti obuhvatio alkalni, Fpg modifikovani komet test, kao i mikronukleus test na ćelijama krvi Alburnus alburnus (uklija). Dodatno, ispitivana je osetljivost RAPD analize u detekciji genotoksičnog efekta. U in silico pristupu na osnovu literature analiziran je toksični/genotoksični potencijal hemijskih parametara koji su detektovani u vodi i u uklijama, a integrativnim metodama vršena je kvantifikacija pritiska zagađenja. Biotestovi su pokazali različitu osetljivost u detekciji genotoksičnog efekta. U in vitro istraživanju koncentrisani uzorci rečne vode su se pokazali pogodnim za testiranje toksičnosti/genotoksičnosti, a ZFL ćelije kao dobar model sistem. U in vivo istraživanju A. alburnus se pokazao kao pouzdan bioindikator. Najveća osetljivost u detekciji genotoksičnog efekta u ćelijama krvi dobijena je u alkalnom komet testu. In silico analizom ne može se izvršiti potpuna predikcija genotoksičnog efekta ksenobiotika na organizme.
Кључне речи:
Velike ravničarske reke; Ekogenotoksikološka istraživanja; In vitro pristup; In vivo pristup; In silico pristup; Osetljivost biotestova; ZFL ćelijska linija; Alburnus alburnus (uklija); Mikrobiološki indikatori fekalnog zagađenja; Monitoring uslovljen efektimaИзвор:
Faculty of Biology, University of Belgrade, 2021, 1-167Финансирање / пројекти:
- Мерење и моделирање физичких, хемијских, биолошких и морфодинамичких параметара река и водних акумулација (RS-MESTD-Technological Development (TD or TR)-37009)