PCR i imunocitohemijska studija ekspresije hondroitin-sulfatnih proteoglikana nakon povrede astrocita u kulturi
Real-time PCR and immunocytochemical study of chondroitin sulfate proteoglycans after scratch wounding in cultured astrocytes
Аутори:
Savić, DanijelaParabucki, Ana
Bjelobaba, Ivana
Santrač, Anja
Dacić, Sanja
Peković, Sanja
Stojiljković, Mirjana
Тип документа:
Чланак у часопису (Објављена верзија)
Метаподаци
Приказ свих података о документуАпстракт:
Uvod: Brojni in vivo i in vitro modeli opisani su sa ciljem da se rasvetle patobiološki procesi koji su osnova traumatske povrede mozga (TPM) i testiraju potencijalni tretmani. Imajući u vidu da je TPM kompleksno oboljenje, ovi modeli se međusobno razlikuju shodno aspektu TPM koji se ispituje. Jedan od in vitro modela je i povreda ćelijskog jednosloja grebanjem (engl. 'scratch wound' assay), isprva ustanovljen kao ponovljiv, jeftin test za analizu celijske migracije in vitro. Cilj ove studije je da se bliže ispita relevantnost ovog modela u odnosu na in vivo modele TPM. Metode: Da bi se istražio odgovor astrocita na mehaničku povredu, praćena je ekspresija odabranih hondroitin-sulfatnih proteoglikana (CSPG) - fosfakana, neurokana i brevikana, korišćenjem PCR u realnom vremenu i imunocitohemije. Rezultati: Dobijeni rezultati su pokazali da in vitro povreda astrocitnog jednosloja menja profile ekspresije ispitivanih CSPG. Četiri sata nakon povrede, primena PCR u realnom vremenu analize pokazala je povećanje nivoa iRNK za fosfakan (trostruko) i neurokan (dvostruko), dok je iRNK za brevikan bila smanjena na polovinu kontrolne vrednosti. Imunofluorescentni signal poreklom od fosfakana i neurokana je bio intenzivniji u astrocitima bližim mestu povrede, dok je signal za brevikan bio slab kako u kontrolnoj, tako i u ozleđenoj grupi. Zaključak: Dobijeni rezultati pokazuju da povreda izazvana grebanjem različito utiče na ekspresiju ispitivanih CSPG u astrocitima, sto ukazuju da ovaj model može biti pogodan za ispitivanje odgovora astrocita na povredu.