Antitumor properites of alchemilla vulgaris agg.

Abstract

Alchemilla vulgaris is well known in traditional medicine especially for the treatment of gynecological problems in women. Several ethnomedicinal studies for the territory of Balkan reports its well known biological properties against many conditions such as infertility, dysmenorrhea, cysts, menopausal complaints and endometriosis. Concidering ethnomedicinal data on female illnesses, the aim of our study was to determine whether ethanol extract of Alchemilla vulgaris agg. exert antitumor effect against mouse breast cancer cells in vitro. Treatment with Alchemilla vulgaris agg. extract decreased viability of mouse breast cancer cells (4T1) in dose-dependent manner after 72 h. The viability decrease was followed by loss of dividing potential after the treatment. In parallel with this, certain percentage of 4T1 cells was subjected to programmed cell death ̶ apoptosis. Detected apoptosis was followed with caspase activation while typical apoptotic morphology of treated cells was observed by fluorescent microscopy. Apart from inhibited cell division and induced apoptosis, decreased cell viability was due to triggered autophagy cell death. In parallel, diminished metastatic potential of these cells was confirmed by abrogated adhesion, invasion, migration and decreased colony forming potential after the treatment. All mentioned effects can be connected with enhanced production of ROS and intracellular NO after the treatment with Alchemilla vulgaris agg. Taken together, the effect of Alchemilla vulgaris agg. against breast cancer cells makes this plant worthwhile for further evaluation in the field of oncology.

Alchemilla vulgaris је добро позната у традиционалној медицини, посебно за лечење гинеколошких тегоба код жена. Неколико етномедицинских студија за територију Балкана описује благотворна дејства ове биљке против различитих патолошких стања попут неплодности, дисменореје, циста, тегоба у менопаузи и ендометриозе. Циљ нашег истраживања био је да се утврдe антитуморска свој- ства етанолног екстракта Alchemilla vulgaris agg. на ћелијској линији тумора дојке 4Т1 in vitro. Третман екстрактом Alchemilla vulgaris agg. у трајању од 72 сата је смањио вијабилитет 4Т1 ћелија на дозно-зависан начин. Смањење вијабилно- сти праћено је губитком пролиферативног потенцијала ћелија. Поред тога, одре- ђени проценат 4Т1 ћелија подлегао је програмираној ћелијској смрти познатој као апоптоза. Детектована апоптоза је праћена активацијом каспаза и додатно потврђена типичном морфологијом нуклеуса коришћењем флуоресцентне ми- кроскопије. Свеукупној антитуморској активности екстракта Alchemilla vulgaris agg. доприноси и ћелијска смрт аутофагијом. Паралелно, метастатски потенцијал ових ћелија је смањен, што је потврђено смањеном адхезијом, инвазијом, мигра- цијом и потенцијалом ћелија да формирају колоније. Сви поменути ефекти могу бити у корелацији са повећаном продукцијом реактивних кисеоничних и азот- них врста детектованом након третмана. У целини, добијени резултати о делова- њу Alchemilla vulgaris agg. на ћелије рака дојке чине ову биљку вредном пажње за даљу евалуацију у области експерименталне онкологије.