Effet de la phosphorylation/dephosphorylation des proteines de la matrice nucleaire sur leur potentiel de liaison a la 5' region du gene de l’haptoglobine au cours de la reaction de la phase aigue

Abstract

La transcription elevee du gene de I'haptoglobine au cours de la reaction de la phase aigue (PA) est accompagnee par une augmentation de I'affinite de fixation des proteines de la matrice nucleaire pour la region 5' du gene de I'haptoglobine. Puisque la reaction PA etait accompagnee par une augmentation de I'activite de la proteine-kinase endoghe dans la matrice, et comme I'elimination des phosphogroupes des proteines de la matrice a de beaucoup diminue leur fixation a I'ADN, on a suppose que la phospholylation/dephosphorylation des proteines de la matrice determine en grande partie leur affinite pour certaines sequences de I'ADN. RESULTATS: La reaction PA est provoque par une injection subcutane de terebenthine. Les nucleus purifies sont isoles du foie de rats sacrifies 24 heures aprh I'induction de la reaction PA, et utilises de meme pour isoler la matrice nucleaire de type I. L'analyse de "Southwestern" des proteines de la matrice nucleaire a montre que I'activite elevee de transcription du gene de I'haptoglobine au cours de la reponse de la PA est accompagnee par une augmentation de I'affinite de fixation de la region - 541/-146 du gene pour les proteines de masse moleculaire 45-70 kD, particuli8rement pour les polipeptides de 55 et 45 kD ainsi que pour les lamines. L'analyse de I'activite de la kinase endogene de la matrice par I'incubation des spheres isoles de la matrice avec 5 uCi de Y32P-ATP et par autoradiographie des proteines separees par electrophorese, a montre une augmentation de I'activite de cette kinase. Son substrat au cours de la PA etaient les proteines de la matrice nucleaire de rnasse moleculaire >35 kD. L'elimination des phosphogroupes des proteines de la matrice nucleaire par incubation avec 1.5 U de la phosphatase alkaline/ lOug proteines a ete suivie par une grande diminution de fixation de ces proteines a I'ADN. Ces donnees nous ont perrnis de supposer que la phosphorylation de certaines proteines de la matrice nucleaire est un mecanisme qui dans les conditions in vivo conditionne une augmentation de leur affinite pour I'ADN precedemment decrite pendant I'augmentation de I'activite de transcription du gene de I'haptoglobine au cours de la PA.